《黔产金钗石斛种质资源及其评价》一书是对贵州金钗石斛资源分布、种植调查研究较为深入的一部著作。本书概述了石斛属植物的研究进展；调查了野生金钗石斛的资源分布、利用情况及人工种植情况，总结了金钗石斛有性繁殖和无性繁殖的两种繁殖方式基本原理和方法；并研究了金钗石斛有效成分、分布规律及其生物碱组分质量控制；探讨了金钗石斛幼苗生长发育以及与外界环境的适应。 本书可为高等院校和科研人员及产业开发人员在贵州金钗石斛分布、生长、种植、管理方面提供参考。

前 言 石斛（Dendrobium）是中医最为常用的名贵中草药之一，具有滋阴润肺、清音明目、轻身延年等功效。目前，国内有数十种以石斛为原料或配伍的中成药产品，如石斛夜光丸、石斛片、金嗓子喉片、脉络宁口服液、脉络宁注射液、养阴口香液、石斛酒（《千金要方》）、石斛散（《圣济总录》）、“枫斗”等，民间也有用石斛来治疗疾病的处方。 金钗石斛（Dendrobium nobile Lindle）是石斛中的上品，既是一种名贵中药材，同时也是一种珍稀植物。由于金钗石斛自然繁殖缓慢，传统繁殖力低，对生境要求苛刻，再加上近年来人类活动对金钗石斛生境的破坏加剧以及不合理的采挖，导致金钗石斛蕴藏量逐年大幅减少，濒于灭绝。自1993年起，金钗石斛先后被列入42种国家重点保护的野生动植物药材品种、贵州省重点保护珍贵树种名录以及国际性的《濒危野生动植物种国家贸易公约》（CITES）附录II。 2002年国家颁布的《中药现代化发展纲要》要求继承和发扬中医药学的传统和优势，利用现代科学技术手段，加强对药用动植物的基础理论研究和应用研究，以促进药用植物资源可持续利用和中医药产业可持续发展；加强中药材规范化种植和中药饮片泡制规范研究，按照《中药材生产质量管理规范》（GAP）要求，建立中药材和中药饮片的质量标准及有害物质限量标准，建立相应的标准操作规程（SOP）；加强常用中药化学对照品研究，建立国家中药标准物质库。《中药材生产质量管理规范》、《中药材种植标准操作规程》、《中药试验标准管理规范》等文件表明：药材的品种标准化和质量控制标准化已成为21世纪中药材研究的焦点，优质品种的选育已成为中药产业成败的关键，现代质控体系的建立是中药产品迈向国际社会的必由之路。近年来，随着中药现代化的开展，药用石斛GAP种植在贵州省赤水（金钗石斛）与兴义（环草石斛）均已建立。其中，赤水产金钗石斛被国家质量监督检验检疫总局公告2006年第39号文件通过，成为贵州省第1个获得原产地域产品保护的中药材产品，为贵州金钗石斛资源的恢复、保护、利用和可持续发展带来了契机。 贵州是我国传统的四大中药材生产地之一。长期以来，黔产石斛就与杜仲、天麻和吴茱萸并称为贵州四大中药材，远销海内外。贵州省对于药用石斛资源的研究相对较晚，缺少系统性，与先进地区存在较大差距。针对这一情况，我们从2002年开始从事黔产金钗石斛的研究，内容涉及金钗石斛种质资源、组织培养与快速繁殖、生理生态、有效成分分析以及化学指纹图谱和DNA指纹图谱等各个方面。经过6年的辛勤工作，取得了一些原创性成果。我们希望这些成果能为国内外学者提供一些贵州金钗石斛的研究现状的资料，同时有助于贵州金钗石斛资源的合理开发利用，促进贵州省中药现代化的发展。 贵州师范大学生物技术与工程学院（现改名为生命科学学院）、贵阳中医学院药学系等单位在实验材料、研究条件、资料查阅和技术操作等方面给予了大力支持。洪化鹏、刘三民、伍庆老师以及罗在柒、唐金刚、卢文芸、吴显芝、邓辉、黄小燕、项君等研究生参与了相关研究工作，此外，杨立昌、张习敏、王岚、邹晶、高巍、马琛、王明勇、郝丽丽、申刚、陈玲、徐小蓉、何培琦、黄家岭、张豪、李军和程思思等老师和同学在本书的整理、排版和校对等方面给予了帮助。这些工作相当繁杂，需要很大的耐心和无私付出，占用了他们很多宝贵时间。没有他们的努力和付出，本书也不会这么快就顺利出版。在此表示衷心感谢！ 由于我们的研究工作尚处于起步阶段，一些最新成果也由于时间仓促而未能及时汇入书中，因此，存在很多不足之处，恳请专家和读者提出宝贵意见。 编 者 2009年1月28日

第1章 石斛属植物研究概述 第2章 黔产金钗石斛种质资源状况 2.1 野生金钗石斛种质资源调查 2.1.1 野生金钗石斛资源调查研究方法 2.1.2 野生金钗石斛生境特点 2.1.3 野生金钗石斛种质资源分布 2.2 野生金钗石斛保护和可持续利用评价 2.2.1 野生金钗石斛濒危原因 2.2.2 野生金钗石斛资源保护措施 2.2.3 野生金钗石斛可持续利用对策 2.3 金钗石斛资源利用现状 2.4 金钗石斛人工种植情况 2.4.1 金钗石斛传统种植概述 2.4.2 金钗石斛规模化种植发展状况 2.4.3 金钗石斛规范化种植基地建设 第3章 黔产金钗石斛的快速繁殖 3.1 金钗石斛的固体培养 3.1.1 金钗石斛种子的消毒 3.1.2 金钗石斛种子萌发和幼苗的形成 3.1.3 金钗石斛外植体的试验选择 3.1.4 金钗石斛原球茎和幼苗的生长条件 3.1.5 金钗石斛生物量 3.1.6 植物生长调节剂的作用 3.1.7 金钗石斛快速繁殖体系 3.2 金钗石斛试管苗的炼苗和移栽 3.2.1 栽培基质 3.2.2 金钗石斛组织培养物的栽培 3.2.3 炼苗前预处理 3.2.4 试管苗的移栽时间 3.2.5 试管苗、温室栽培苗和荫棚栽培苗的比较 3.2.6 杀虫剂氯氰菊酯 3.2.7 试管苗的异地移栽 3.3 金钗石斛的其他快速繁殖方式 3.3.1 分株繁殖 3.3.2 扦插繁殖 3.3.3 壅土埋条繁殖 3.3.4 高芽繁殖 3.4 小结 第4章 黔产金钗石斛有效成分及其累积规律 4.1 有效成分分析 4.1.1 精油成分 4.1.2 石斛碱成分 4.2 次生代谢物的积累规律 4.2.1 不同生境金钗石斛有效成分的变化 4.2.2 不同发育阶段金钗石斛有效成分的积累 4.2.3 不同部位金钗石斛的有效成分含量 4.2.4 施肥影响金钗石斛生物碱积累 4.2.5 植物生长调节剂影响金钗石斛生物碱积累 4.3 金钗石斛药材质量的综合评价 4.4 小结 第5章 黔产金钗石斛的质量标准 5.1 金钗石斛样品考察 5.2 金钗石斛生物碱组分GC指纹图谱研究 5.2.1 金钗石斛生物碱组分提取方法的优化 5.2.2 色谱柱的选择 5.2.3 方法学考察 5.2.4 金钗石斛生物碱部分指纹图谱的建立 5.3 金钗石斛生物碱组分的HPLC指纹图谱研究 5.3.1 供试品制备 5.3.2 参照物制备 5.3.3 提取方法考察 5.3.4 色谱条件的考察 5.3.5 检测方法考察 5.3.6 HPLC色谱指纹图谱的建立 5.4 药用石斛ISSR分子标记指纹图谱研究 5.4.1 金钗石斛基因组DNA的纯化 5.4.2 ISSR-PCR反应体系和反应参数 5.4.3 引物筛选 5.4.4 引物的基因分型能力评价 5.5 小结 第6章 黔产金钗石斛的栽培生理 6.1 金钗石斛幼苗的生长 6.1.1 无机肥与幼苗生长 6.1.2 植物生长调节剂与幼苗生长 6.1.3 金钗石斛生物量的积累 6.2 金钗石斛生长过程的质量评价 6.2.1 金钗石斛的生长评价 6.2.2 金钗石斛的药用成分评价 6.3 内生真菌的促生作用 6.3.1 有益内生真菌的筛选 6.3.2 内生真菌对金钗石斛生理代谢的影响 6.3.3 内生真菌诱导子对金钗石斛生理代谢的影响 6.4 金钗石斛对干旱胁迫的响应 6.4.1 金钗石斛植株生长对干旱胁迫的响应 6.4.2 金钗石斛含水量对干旱胁迫的响应 6.4.3 金钗石斛可溶性蛋白质含量对干旱胁迫的响应 6.4.4 金钗石斛渗透调节对干旱胁迫的响应 6.4.5 金钗石斛细胞质膜透性对干旱胁迫的响应 6.5 外源CA2+对干旱胁迫下金钗石斛幼苗生长的影响 6.6 金钗石斛组培苗的光合特性 6.6.1 叶绿素含量 6.6.2 希尔反应 6.7 小结 缩写词 附录A 图版 附录B 参考文献